大家好，今天来为大家分享elisa方法的一些知识点，和elisa试剂盒说明书的问题解析，大家要是都明白，那么可以忽略，如果不太清楚的话可以看看本篇文章，相信很大概率可以解决您的问题，接下来我们就一起来看看吧！

本文目录

1. elisa法大概步骤
2. elisa是定性还是定量试验
3. elisa的标记物是什么
4. elaisa和wb的区别
5. 艾滋病的检测方法有哪些

一、elisa法大概步骤

方法一用于检测未知抗原的双抗体夹心法:

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。

2.加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。

3.加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。

4.加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。

5.终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O·D值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔O·D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

方法二用于检测未知抗体的间接法：

用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。

二、elisa是定性还是定量试验

elisa是定量试验，定性实验是检测有没有，定量实验是检测各组量的多少，elisa是检测量多少的实验。

三、elisa的标记物是什么

1、elisa的标记物是辣根过氧化物酶。

2、ELISA即酶联免疫吸附测定，指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。

3、ELISA应用的范围很广，而且正在不断地扩大，原则上ELISA可用于检测一切抗原、抗体及半抗原，可以直接定量测定体液中的可溶性抗原。在实际应用方面可用于疾病的临床诊断、疾病监察、疾病普查、法医检查、兽医及农业上的植物病害的诊断检定等。

四、elaisa和wb的区别

ELISA可用定量方法检测蛋白,也就是说你可以观察不同浓度刺激物对目的蛋白的影响。

2.WB所检测的一般是抗原，而Elisa抗原抗体都可以检测。

WB所检测的抗原可以知道其分子量的大小，或是否是多聚体、降解产物等。

3.一般Elisa的灵敏度要远高于WB，这从一般酶标记物的使用浓度或待检样品的稀释度上就可以看出。

4.WB一次样本量就是一块胶，10-20个样品最多了。Elisa一块96孔板一次可以处理96个样本，可以设置多个复孔、对照、梯度样等来提高检测的可信度。

5.WB实验时间时间更长，操作更繁琐。Elisa有很多现成的试剂盒，按照说明书操作即可。

五、艾滋病的检测方法有哪些

艾滋病可以通过检测血液中HIV病毒的抗体、抗原、HIV病毒的核酸或血液病毒培养来确定。抗体检测分HIV-1和HIV-2抗体，是目前国内诊断HIV感染的标准依据。分初筛检查和确证试验两种。初筛检查采用酶联免疫吸附试验（ELISA）、化学发光法、免疫荧光法。

文章分享结束，elisa方法和elisa试剂盒说明书的答案你都知道了吗？欢迎再次光临本站哦！