各位老铁们，大家好，今天由我来为大家分享rna提取方法，以及热酚法提取rna的相关问题知识，希望对大家有所帮助。如果可以帮助到大家，还望关注收藏下本站，您的支持是我们最大的动力，谢谢大家了哈，下面我们开始吧！

本文目录

1. RNA提取原理
2. RNA提取问题
3. RNA提取方法有哪些
4. 如何从细菌中提取RNA
5. 小鼠组织的rna怎么提取

一、RNA提取原理

RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一种总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速裂解细胞，抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。Trizol作用原理:在匀质化或溶解样品中，Trizol试剂可保持RNA的完整性，同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后，裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。水相转移后，RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后，用乙醇可从中间相沉淀得到DNA，加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。

二、RNA提取问题

RNA提取步骤及注意事项（仅供参考）：实验步骤如下：

1.取50—100mg的组织,加入1mlTrizol试剂，用匀浆器打匀(Trizol先放于冰上)。

3.加入200μl氯仿,剧烈震荡混匀30s，冰上静置3min。

5.将上清液小心转移到新的1.5ml离心管中（取400μl），加入等量体积的异丙醇，上下颠倒几次混匀，室温下放置15min。（此步中注意：不要吸取任何中间层物质，宁缺勿烂。）6.12000rpm，4℃离心15min。7.小心移去上清液，防止RNA沉淀丢失。8.用70%乙醇（DEPC处理的水配制）洗涤1次，加入700μl乙醇，将RNA沉淀弹起，漂洗。（此时RNA是不溶解的）9.8000rpm，室温离心10min。10.尽可能彻底地吸走上清，防止RNA沉淀丢失。11.真空离心干燥3—5分钟，或放在室温下使乙醇完全挥发掉。12.沉淀用30μlDEPC-H2O溶解。如发现沉淀难溶，68℃处理10min。13.RNA检测(1)测定样品在260nm和280nm的吸光值按1OD=40μg/mlRNA计算RNA的产量。OD260/OD280在1.8-2.0。(2)进行甲醛变性琼脂糖凝胶电泳,确定RNA的完整性和污染情况。注意事项：1.获得RNA效率低有一下原因a:样品裂解或匀浆处理不彻底b:最后得到地RNA沉淀未完全溶解2.A260/A280＜1.65原因a:检测吸光度时，RNA样品不是溶于TE，而是溶于水。低离子浓度和低PH条件下，A280值会较高b:样品匀浆时加地试剂量太少c:匀浆后样品未在室温放置2分钟d:水相中混有有机相e:最后得到地RNA沉淀未完全溶解3.RNA降解原因a:组织取出后没有马上处理或冷冻b:样品或提取地RNA沉淀保存于-5--20度，未在-60--70度保存c:细胞在胰酶处理时被破坏d:溶液或离心管未经RBase去处理

三、RNA提取方法有哪些

RNA提取方法或技术有哪些 通过变性剂破碎细胞或者组织，然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA，再经过沉淀，洗涤，晾干，最后溶解。但是由于RNA酶无处不在，随时可能将RNA降解，所以实验中有很多地方需要注意，稍有疏忽就会前功尽弃。

四、如何从细菌中提取RNA

1、想法很美好，现实很骨感。理论是可行，现实中却办不到我建议楼主第一步，先分离目标细菌。

2、第二步，用动物组织液（或者植物组织液）大规模培养目标细菌。

3、第三步，提取目标细菌的RNA从动植物组织中直接提取细菌RNA简直是痴人说梦。

五、小鼠组织的rna怎么提取

提取小鼠组织中的RNA可以使用以下方法：

a.将收集到的小鼠组织切碎，并加入TRIzol（一种含有酚和胺的试剂），充分混合。

c.离心样品，使其分成两相（上清液和有机相）。

d.将上清液转移到新离心管中，并加入异丙醇沉淀RNA。

f.使用乙醇洗涤和去除残留的试剂，然后溶解RNA沉淀。

a.将小鼠组织切碎并加入裂解缓冲液。

b.用离心将细胞碎片和细胞核分离。

c.加入酚/氯仿提取液，混合并离心。

d.将上清液转移到新离心管中，加入异丙醇沉淀RNA。

f.使用乙醇洗涤和去除残留的试剂，然后溶解RNA沉淀。

可以使用商用的RNA提取试剂盒，根据试剂盒提供的操作手册进行操作。常见的商用试剂盒包括Qiagen的RNeasyMiniKit、ThermoFisherScientific的TRIzolReagent等。

这些方法提供了一些常用的小鼠组织RNA提取方法，但具体的选择取决于您的实验目的、设备和实验室条件等因素。在进行实验之前，建议仔细阅读和遵循相关的操作手册，并确保采取适当的实验室安全措施。另外，如果您不具备相关实验技术或经验，建议寻求专业实验室或技术人员的帮助和指导。

END，本文到此结束，如果可以帮助到大家，还望关注本站哦！